【摘要】肝癌动物模型是肝癌基础与临床研究工作中的重要工具，以鼠模应用最为广泛。本文通过回顾当下动物实验研究常用的肝癌鼠模型，对自发性肝癌鼠模型、诱发性肝癌鼠模型、移植型肝癌鼠模型、转基因肝癌鼠模型4种主要鼠模型的研究现状及发展进行综述如下。
【关键词】肝癌动物模型；鼠模型；研究现状
原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，其在国内恶性肿瘤中的死亡率仅次于胃癌，居于第二位，且发病率仍在不断上升。及早发现、早期诊断、有效治疗是肝癌患者取得良好预后的重要因素，目前已有大量研究为肝癌临床的治疗提供基础依据。在这些研究中，肝癌动物模型一直是原发性肝癌临床与基础研究工作的重要工具，以肝癌鼠模型应用最为广泛。以下本文通过回顾当下动物实验研究常用的肝癌鼠模型，对自发性肝癌鼠模型、诱发性肝癌鼠模型、移植型肝癌鼠模型、转基因肝癌鼠模型4种主要鼠模型的研究现状及发展进行综述如下。
1自发性肝癌鼠模型
自发性肝癌鼠模型是指实验鼠在自然培育情况下所发生的、未经有意识人工处理的肝癌，或因基因突变的异常表现经遗传育种而保留下来的鼠肝癌模型[1]。与其他鼠模型不同，
该模型是在完全自然条件下发病，因而排除了人为因素的干扰，保证了实验结果的相对客观性和公正性。实验研究发现，与人类肝癌相类似，鼠自发性肝癌的发生、发展包含了肿瘤的易感性与环境的相互作用，其中环境主要反映在致癌物质及促癌物质的积聚程度上。研究也发现，鼠自发性肝癌的发生与鼠的种系（近交系小鼠多发[2]）、性别、环境及饲养等因素相关。另一方面，由于鼠自发性肝癌发病率低且模型稳定性差，其病变的发生时间较难预测，且实验鼠本身在性别、体质量等方面存在差异，病灶大小、病灶数目、病灶发生部位等也不同，因此该模型仍具有一定的研究局限性。
2诱发性肝癌鼠模型
相对于自发性肝癌鼠模型，诱发性肝癌鼠模型是指实验鼠在特定实验条件下而诱导发生的肝癌。化学药物诱导法因其操作简单、来源广、价格较便宜而被广泛应用于该模型的研究中。常用化学药物包括二乙基亚硝胺（DEN）、四氯化碳（CCl4）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、3′-甲基奶油黄（3′-Met-DAB）、乙酰氨基芴AAF）等[3]。诱发性肝癌鼠模型的优点是其发病隐匿、病程长，诱癌成功率相对高，多为弥漫性结节型肝癌，可并发或不并发肝硬化，这与人类肝癌的发病特点与过程相类似。但该模型诱导时间长、实验鼠死亡率高，其肝癌病变的发生时间、病灶大小、数目、发生部位等的个体差异性较大。由于该模型的诱发因素与实验条件可以人为控制，故多用于对肝癌的发病因素、发病机制、遗传研究、生物学行为分析等学科的研究中[4]。
3移植型肝癌鼠模型
移植型肝癌鼠模型是指将源于动物或人的肝癌细胞株或肝癌组织块直接接种于实验鼠体内所形成的荷肝癌鼠模型，以裸鼠最常应用[5]。1969年Rygaard[6]通过实验研究证实了人肝癌裸鼠移植模型是除人体外最接近于人肝癌的实验模型，且具有造模周期短、成功率高等优点。
3.1皮下移植肝癌鼠模型
3.1.1肝癌外科标本移植自1981年1月将1例人体肝癌成功移植到裸鼠，肝癌外科标本移植可传到第三代[7]。早期为取人肝癌外科标本，置入1640培养液，清除坏死组织，将剪成1-2mm的2-3个癌小块用套管针种入裸鼠颈背部皮下部位。虽然外科肝癌标本移植成功率较低，但肝癌原有的形态与功能保持较好。
3.1.2肝癌细胞株移植白建华等[8]取第3-4代对数生长期的肝癌BEL-7404细胞，用胰酶消化细胞后1000r/min离心5min，弃掉培养液，用生理盐水重悬后计数，调整细胞密度为1.0×1010/L，抽取细胞悬液150μL，用套管针种入裸鼠颈背部皮下部位，成功建立种植性肝癌模型。
3.2皮下-肝原位移植肝癌鼠模型白俊文等[9]培养对数生长期 BEL-7402人肝癌细胞，现接种于右侧腋窝皮下，待形成皮下移植瘤后再行移植到裸鼠肝内，用α-氰基丙烯酸烷基酯建立间接肝原位移植模型，此方法的移植成功率较高，达93.3%左右。但该模型易发生局部（局部侵袭率可100%）及远处转移（自发转移率在50%以上）。
3.3肝原位移植肝癌鼠模型麦莜莉等[10]将裸小鼠腹腔麻醉，取仰卧位，固定四肢，碘伏消毒后于腹中线剑突下纵行约0.8cm小切口，使肝左叶突出腹腔，用微量注射器抽取30ulH22腹水，针头与肝脏表面呈30°角，刺入肝实质，将30ulH22腹水缓慢注射入小鼠肝脏，用生理盐水小心沾洗肝脏表面，分层关闭腹腔。术后予10ul青霉素注射液肌注抗感染。虽然此模型的操作较复杂，这些操作较皮下移植模型难度大，但它是目前最能显示人肝癌生物学行为（如腹腔浸润转移、腹水等表现）的模型，所以此模型受到研究者们的认可。
3.4腹腔移植肝癌鼠模型腹腔移植肝癌鼠模型是指将小块裸鼠人肝癌组织模型或人肝癌细胞株0.3mL注入到裸鼠右下腹腔内，而形成的肝癌[11-12]。该模型操作较简单，移植成功率高（达100%）。研究发现，腹腔移植肝癌鼠模型中可出现一定的人肝癌生物学行为，可发生与人肝癌相类似的浸润、转移、腹水，并可在肌肉组织、肠、胰、肾等器官中发生局部侵袭，以及发生肝内转移或远处转移。但其植瘤位置深，观察、测量难度大，是该模型的不足之处。
3.5转移肝癌鼠模型肝癌术后的复发转移仍是困扰临床医师和研究者的一项重要问题，研究肝癌转移复发的机制并寻找出有效的防治对策，是延长患者生存、改善预后的关键。裸鼠人肝癌转移模型是一个必要的研究工具，但是转移模型还没有很有效的建立方法，要通过其他的方法来实现，实施起来有相当的困难。
4转基因肝癌鼠模型
随着转基因技术和分子生物学技术的发展，转基因动物肝癌模型的建立使得肝癌的发病机制及临床治疗研究手段进一步丰富。
4.1肝炎病毒转基因肝癌模型乙型肝炎病毒（HBV）作为人类肝炎和肝癌发生的重要病因目前已经被证实。但因HBV感染培养细胞与实验动物的机率均较低，在一定程度上限制了病机的研究。肝炎病毒转基因肝癌模型的建立为其致病机制与治疗疫苗的筛选等提供了新的研究途径。1999年我国开展了建立乙型肝炎病毒（ayw亚型和adr亚型）转基因小鼠模型的研究，并获得成功[13]。有研究表明[14]，HBx抗原参与了的HBV转录，并调节了其它病毒基因的表达，抑制了宿主的生物合成，干扰基因表达与细胞分化，最终导致肝癌形成。
4.2SV40转基因肝癌模型V40转基因动物会发生细胞异常，ATⅢ基因启动增强子调节下的SV40基因可引起肝癌，Dubois等[15]通过人ATⅢ基因及SV40-Tags序列构建的外源DNA成功建立了SV40转基因小鼠肝癌模型，该模型的部分动物出现了肺转移，说明ATⅢ-T转基因诱导的肿瘤恶性程度较高。
4.3TGFβ1转基因小鼠肝癌模型Factor等[16]利用猪转化生长因子-β1（TGFβ1）成功构建了TGFβ1转基因小鼠肝癌模型，通过对该模型的观察表明，小鼠肝癌的平均潜伏期大约为16-18个月，肝癌发生率为59%左右。
4.4TGFα/c-myc转基因小鼠肝癌模型Murakami等[17]将构建的4.5kb Alb/c-myc基因转入F1受精卵，培育出Alb/c-myc转基因小鼠肝癌模型；然后将2.3kb EcoRI MT-TGFα基因转入CD1受精卵，培育出MT/ TGFα转基因小鼠肝癌模型。最后将2种转基因小鼠交配，而获得TGFα/c-myc转基因小鼠肝癌模型。
5结语
自20世纪早期成功建立小鼠自发性肝癌动物模型后，领域对肝癌鼠模型的研究不断深入，并逐步建立了自发性肝癌鼠模型、诱发性肝癌鼠模型、移植型肝癌鼠模型、转基因肝癌鼠模型4种主要肝癌鼠模型。这些肝癌鼠模型均有各自的优缺点，研究者应根据其研究的具体目的、实验室客观条件等来选择合适的肝癌鼠模型进行研究。鼠在肝癌动物模型中的敏感性及特异性已经被证实，根据不同鼠的品种、年龄、性别、体质等差异来找出最合适实验模型，是研究者今后需要努力的方向。
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