[摘要]目的 探討黄芪不同炮制品对脾虚小鼠胃肠功能的影响与多糖含量的相关性。方法 选取体重接近的健康小鼠60只，随机分成对照组、模型组、黄芪生品试验组、蜜黄芪试验组、米黄芪试验组、麸黄芪试验组。每组10只小鼠。采用苯酚一浓硫酸比色法测定黄芪不同炮制品多糖的含量，采用炭末标记法研究黄芪不同炮制品对大黄致泻的脾虚小鼠的胃排空率及小肠推进率的影响，分析两者的相关性。结果 黄芪不同炮制品对脾虚小鼠的胃排空率及小肠推进率的影响：蜜黄芪>米黄芪>麸黄芪>生黄芪。相对于模型组来说，黄芪不同的炮制品对胃排空率及小肠推进率均有一定的抑制。相对于生黄芪而言，经辅料炮制的黄芪对胃排空率及小肠推进率抑制较高。不同的黄芪炮制品对于脾虚小鼠胃排空率及小肠推进率的影响不同。蜜黄芪>米黄芪>麸黄芪>生黄芪。经辅料炮制后的黄芪的胃排空率与小肠推进率与对照组无显著性差异，表明经治疗后胃肠功能已接近正常水平。结论 黄芪不同炮制品抑制脾虚小鼠胃排空率及小肠推进率与多糖的含量成一定的正相关性。
[关键词]黄芪；炮制品；脾虚小鼠；胃肠功能；多糖含量；相关性
[中图分类号] R283.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）07（b）-0145-03
[Abstract]Objective To investigate correlation of effects of different processed products of Astrsgalus membranaceus on gastrointestinal function of spleen deficiency mice and polysaccharides content.Methods 60 healthy mice were selected and randomly divided into the control group，the model group，the Astragalus quality test group，the honey Astragalus test group，the rice Astragalus test group and the Astragalus membranaceus experimental group.There were 10 mice in each group.Determination of content of Astragalus Polysaccharides of different processed products of colorimetric method using phenol sulfuric acid，and the gastric emptying rate of carbon powder in small intestine of mice with spleen deficiency of Huangqi markers of different processed products of rhubarb lapactic advance rate and compare correlation between.Results Different processed products of spleen deficiency mice gastric emptying rate and intestinal propulsive rate： the influence of honey Astragalus Astragalus，astragalus，rice bran，astragalus.Compared with the model group，the different processed products of Astragalus had some inhibition on the rate of gastric emptying and the rate of small bowel propulsion.Compared with the Astragalus membranaceus，the Astragalus membranaceus prepared by the adjuvant inhibited the gastric emptying rate and the intestinal propulsive rate.The effects of different Astragalus processed products on gastric emptying rate and intestinal propulsive rate of spleen deficiency mice were different.Honey astragalus root > rice astragalus root > Astragalus membranaceus > Astragalus membranaceus.There was no significant difference in the gastric emptying rate and the small intestinal propulsive rate between the processed Astragalus and the control group，indicating that the gastrointestinal function was close to the normal level after treatment.Conclusion The gastric emptying rate and intestinal propulsive rare of spleen deficiency mice controlled by different processed products of Astragalus membranaceus have positive correlation with polysaccharides content.
[Key words]Astragalus membranaceus；Drug Processing；Spleen deficiency mice；Gastrointestinal function；Polysaccharides content；Correlation
《中国药典》规定，黄芪是豆科植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的干燥根。黄芪最先记载在《神农本草经》，味甘微温，入肺脾经，具有补气固表的作用[1-2]。现代药学研究提示，黄芪多糖是黄芪有效成分含量最高的一种，也是其主要的活性成分[3-4]。黄芪经过蜜、米、麦麸炮制后，可增强补脾益气的功效。中药的成分复杂，不同的炮制方法会使其有效成分发生变化，因而了解其药性随着炮制的不同而出现化学成分的变化至关重要[5]。本文探讨黄芪不同炮制品对脾虚小鼠胃肠功能的影响与多糖含量的相关性，为近一步阐明黄芪的炮制机理提供一定的依据。
1试验材料
1.1动物
ICR小鼠，18～22 g，60只，雌性各半，购于辽宁省实验动物资源中心，许可证号：SCXK（辽）2016-0004。
1.2试药
Heλios γ紫外分光光度计（Thermo Electron Corporation），BP211D电子天平（赛多利斯），葡萄糖对照品（批号：110833-201205，中国食品药品检定研究院提供）；所用试剂（AR）：大黄、黄芪购于广州市药材公司中药饮片厂。
2方法
2.1黄芪的炮制
蜜黄芪：取净黄芪片，加25%炼蜜（1/3开水稀释），拌匀，闷润至蜜被吸尽，文火炒至深黄色且不粘手时，取出并放凉；米黄芪：将20%米置于锅内翻炒至冒烟，加入黄芪片炒至深黄色取出，筛去米并放凉；麸黄芪：将15%麦麸置于锅内翻炒至冒烟，加入黄芪片炒至深黄色取出，筛去麦麸并放凉。
2.2黄芪及其炮制品水煎液的制备
取生黄芪及各黄芪炮制品各100 g，分別加石油醚500 ml，回流脱脂2次，1 h/次，再用80%乙醇回流提取2次，2 h/次，弃去乙醇提取液，将药渣分别加8倍量的水，于90℃水浴提取2次，2 h/次，合并滤液，浓缩成含2 g /ml黄芪水煎液，密封，放冰箱冷藏以备用[6]。
2.3黄芪及其炮制品水煎液多糖含量的测定
标准曲线制备：分别量取葡萄糖标准溶液（0.05 mg/ml）2、4、6、8、10、12、14、16 ml于25 ml容量瓶中加蒸馏水定容，取标准液1 ml于 10 ml具塞试管中，加入5%的苯酚溶液1.0 ml，摇匀后迅速加入5 ml浓硫酸显色，振荡5 min。置于沸水浴中加热30 min，取出后冷却至室温。另取1 ml蒸馏水同法做成空白参比溶液，测定吸光度（A），以A为纵坐标，葡萄糖浓度（C）为横坐标，求出标准回归方程。
样品含量测定：精密吸取黄芪炮制品水煎液各1 ml，于100 ml 容量瓶中加蒸馏水定容，移取2 ml于10 ml具塞试管中，以下同标准曲线制备方法。采用蒸馏水同法做空白参比溶液，分别测定A，代入回归方程计算样品浓度，然后计算黄芪不同炮制品中多糖含量[7]。
2.4大黄水煎液的制备
将生大黄在8倍水中浸泡0.5 h，煮沸40 min。用纱布过滤，再加入6倍水煮沸20 min，用纱布过滤，将2次滤液合并，在60℃水浴中浓缩成大黄水煎剂（浓度为1 g/ml），高压灭菌后，冷藏保存。
2.5胃排空及小肠推进试验
选取体重均等小鼠60只，随机分成对照组、模型组、黄芪生品试验组、蜜黄芪试验组、米黄芪试验组、麸黄芪试验组，每组10只小鼠。对照组小鼠给予口服生理盐水，每只20 ml/kg，1次/d，一直给予至试验结束。模型组、试验组给予口服大黄水煎剂，每只20 ml/kg，1次/d，在给予这些小鼠大黄水灌服后，每天观察小鼠的精神、食欲、粪便等情况。观察一直到小鼠的脾虚模型已经建立成功后为止[8]。当小鼠的脾虚模型经建立后，建模组给予生理盐水，每只20 ml/kg。试验组分别给予生黄芪、蜜黄芪、米黄芪、麸黄芪水煎液，每只20 ml/kg，1次/d，一直连续14 d。于末次灌胃60 min后，按30 ml/kg灌胃半固体黑色糊（取羧甲基纤维素钠10 g，置于250 ml水中，待完全溶解后，加入奶粉16 g，淀粉8 g，蔗糖8 g和活性炭粉末2 g，搅拌均匀，即得），20 min后脱颈椎处死小鼠，开腹，结扎胃贲门和幽门，取胃，用滤纸拭干后称全重，剪开胃体，洗去胃内容物后拭干，称净重。以胃全重和胃净重的差值为胃内残留物重，半固体糊重量与胃内残留物的差值为胃排空量，计算胃排空量占所灌半固体糊重量的百分比为胃内残留率。同时取出小肠，将小肠拉成直线，测量小肠的全长及幽门至黑色半固体糊前沿的距离。计算胃排空率和小肠推进率[9]。小肠推进率=炭末推进距离/小肠全长×100%；胃排空率=（半固体糊重量-胃内残留量）/半固体糊重量×100%。
2.6统计学方法
采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
3结果
3.1黄芪不同炮制品多糖含量
不同炮制品中多糖类成分含量存在差异，蜜黄芪（9.68%）>米黄芪（7.57%）>麸黄芪（6.81%）>生黄芪（5.24%），其中蜜黄芪最高，生黄芪最低，与黄芪比较，其余3种炮制品多糖含量均较高（P<0.05）。
3.2黄芪不同炮制品对脾虚小鼠胃排空率与小肠推进率的影响
与对照组比较，模型组的胃排空率、小肠推进率显著升高，差异有统计学意义（P<0.05），说明造模成功。相对于模型组来说，黄芪不同的炮制品对胃排空率及小肠推进率均有一定的抑制。相对于生黄芪而言，经辅料炮制的黄芪对胃排空率及小肠推进率抑制较高。不同的黄芪炮制品对于脾虚小鼠胃排空率及小肠推进率的影响不同。蜜黄芪>米黄芪>麸黄芪>生黄芪。经辅料炮制后的黄芪的胃排空率与小肠推进率与对照组无显著性差异（P>0.05），提示经治疗后胃肠功能已接近正常水平（表1）。
4讨论
中医认为，“脾为后天之本”，具有统率机体防御能力的功能。大量实验与临床研究提示，“脾虚”时消化系统功能处于紊乱状态，机体的细胞免疫和体液免疫状态均有不同程度的降低，以细胞免疫功能最为明显[10]。黄芪具有促进小肠蠕动，改善机体胃肠功能的作用[11]。黄芪多糖的主要生物活性是调节机体免疫力，并且其他的生物活性很大程度上都基于其对机体免疫系统的调节作用[12-13]。
由于黄芪的成分较为复杂[14]，本文多糖的提取是采用石油醚，乙醇處理药材，除去了单糖，再用水提取；多糖的含量测定则采用的是苯酚-浓硫酸比色法[15]。
本试验结果显示黄芪不同炮制品对脾虚小鼠消化道机能下降导致胃排空率与小肠推进率升高均都有明显抑制作用，而且抑制作用的强弱与多糖含量成现一定的正相关性。
综上所述，黄芪补脾益气作用可能与黄芪多糖提高小鼠免疫力有关，也为如何近一步完善黄芪的炮制工艺有一定借鉴作用。
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（收稿日期：2017-06-01 本文编辑：马 越）