摘要:将150只12日龄鸡随机分为5组,人工感染柔嫩艾美耳球虫,以鸡平均增重率、盲肠病变记分、卵囊值和抗球虫指数等指标为参数,综合评价中药和盐霉素单独及联合应用的抗球虫效果。研究结果表明:盐霉素组抗球虫指数为159.5,抗球虫效果中等;中药组抗球虫指数为181.5,抗球虫效果优秀;中药和盐霉素联合用药组的抗球虫指数为200.2,抗球虫效果也为优秀。试验证明中药和盐霉素联合用药效果要好于中药和盐霉素单独用药的效果。
关键词:中药;盐霉素;球虫;疗效
中图分类号:S858.31;S854/857 文献标识码:A文章编号:1007-273X(2010)09-0010-04
鸡球虫病是全球性流行的主要的寄生虫病,在所有鸡病中发病率最高,是现代集约化养鸡业中最为常见、多发、危害极大的肠道寄生性原虫病。球虫病对养禽业造成了严重的经济损失,据报道全世界每年因鸡球虫病造成的损失高达5亿英镑[1]。虽然球虫病可以通过预防性使用广谱抗球虫药来控制,但是由于球虫耐药性的不断出现,使很多抗球虫药物使用年限不断缩短,加上药物的研制费用很高,以及人们对药物残留的日益关注,迫切需要寻找新的防治球虫病的方法来解决这一问题。
鸡球虫病是由孢子虫纲、球虫目、艾美耳科中的各种球虫引起的一种寄生虫病。鸡球虫的发育史需经过三个生殖阶段:孢子生殖(Sporogony)、裂殖生殖(Merogony)和配子生殖(Gametogony)。其中,球虫最能发挥其病害性的时期为裂殖体生殖期。这一时期,因球虫的增殖切断肠黏膜组织、毛细血管及小血管,短时期引起大量出血,这是造成鸡死亡的主要原因[2]。一方面给养鸡业造成巨大的经济损失,另一方面由于人们食用禽肉产品,从而间接影响人类健康。因此,该病一直受到人们的高度重视。
鸡球虫是一种分布极其广泛的寄生虫,几乎有养鸡的地方就存在鸡球虫。设施及管理越落后的地方球虫病越厉害[3]。球虫卵囊具有极强抵抗力,而常用的消毒剂没有一种能杀灭球虫卵囊,常规的卫生防疫制度不能阻止球虫卵囊的散播。鸡球虫病防治十分困难,其发病率为50%～70%,死亡率为20%～30%,严重时高达80%[4]。
到目前为止,对该病的防治主要依靠西药。市场上的抗球虫的西药已有30多种,较为常见的有:伏球(地克珠利)、盐霉素、鸡用球宁(氨丙啉)、加福(马杜拉霉素)等。西药的优点是见效快,疗效显著。但抗球虫西药也存在着一些缺陷:首先,球虫极易对药物产生耐药性,且抗球虫化学药物毒性较大,使用不当易发生中毒。许多抗球虫药物在推广使用数年后即出现耐药性问题。其次,抗球虫药容易残留于禽蛋及肉中,威胁人类健康。主要表现为变态反应、过敏反应和细菌耐药性等方面[5]。变态反应症状多种多样,轻者表现为红疹,严重者甚至发生危及生命的综合征。在人们崇尚绿色食品的今天,药物残留问题已越来越引起人们的广泛关注。
近年来,关于中草药防治鸡球虫的报道不断增多,用天然中草药防治鸡球虫病逐渐被人们所重视,中药多为天然植物药,用中药防治鸡球虫病,既可达到防治球虫病的目的,又可缓解因兽药残留而影响肉鸡出口问题,具有很好的发展前景[6]。而且中药的药源广泛、方剂组方变化多,为研发抗球虫新药提供了良好的基础[7]。试着开发中草药资源,用以防治鸡球虫病有很大的空间[8]。但中药的缺点是显效太慢,而肉鸡的生长周期太短,并且中药用量大,影响饲料的组成和适口性等。
近年来复方制剂的研究受到人们的青睐。李佩国等[9]采用中西联合用药(中药和马杜霉素)的方法,防治鸡球虫病,结果表明,联合用药组的抗球虫指数(Anticoccidial Index,ACI)达189.5,比单独使用中药或马杜霉素组分别提高了15.48%和13.57%。李蕴玉等[10]也对中药与地克珠利联合应用防治鸡球虫病的效果进行了试验研究,结果表明,联合用药组的抗球虫指数为202.4,比单独使用地克珠利和中药组分别提高了11.89%和23.34%,表明联合用药防治鸡球虫病是增强药物疗效、减少西药用量及延长药物效用期的有效方法。
本试验就针对中药和西药单独和联合使用的抗球虫效果进行研究,来探究抗球虫药物的疗效。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验药品复方中药,盐霉素(为市售产品)。
1.1.2 试验器材离心机:DL-500B,上海卢湘仪离心机仪器有限公司生产;冰箱:BCD-208/A CJN,海尔集团有限公司生产;电子分析天平:AR2140,Ohaus Corp Brook,NJ,USA;生物显微镜:XSP-6C,上海精密仪器仪表有限公司生产;隔水式电热恒温培养箱:PYX-DHS-X,上海跃进医疗器械厂生产;组织捣碎机:DS-1,上海精密仪器仪表有限公司生产;全价肉小鸡颗粒料:青岛青牧饲料厂生产;电子称:MB10K,上海精密仪器仪表有限公司生产。
其他仪器有:铁丝笼、烧杯、载玻片、盖玻片、纱布、剪刀、酒精喷灯等。
1.1.3 试验用卵囊试验用孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊(为临床株),由青岛农业大学兽医药理研究室提供。试验前人为感染无球虫鸡传代1次,获得试验用卵囊,28℃条件下,在2.5%重铬酸钾溶液中孢子化处理后,保存于4℃冰箱中备用。
1.1.4 试验动物出壳肉雏鸡150只,饲养在经高温消毒的铁丝笼内,给予连续的人工光照,饲喂不含球虫卵的全价肉小鸡颗粒料,饮用洁净自来水。饲养至12日龄,试验前粪检无球虫卵囊确认未发生自然感染方可采用。
1.2 方法
1.2.1 试验处理及分组12日龄时除健康对照组外,全部试验组雏鸡均经口人为感染鸡柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,接种剂量为5万/只。在攻虫前和剖杀前各称重一次,对体重进行详细纪录。15日龄时在每笼下面铺报纸,开始记录每组的血便情况。19日龄时结束试验,称重、剖杀,进行肠道病变记分,测定每克粪便卵囊数(OPG),肠道卵囊计数,统计各组增重及相对增重率。试验期间自由饮水、采食,如出现死亡,应剖检查明是否因球虫致死,并将因球虫死亡的鸡的盲肠收集起来,置4℃的冰箱中保存,非球虫致死不列入统计。
动物分组及分组后的处理见表1。
1.2.2 药效判断指标
1.2.2.1 临床表现试验期间观察鸡的临床表现,如精神、食欲、粪便变化情况,记录各试验组的发病和死亡情况。
1.2.2.2 相对增重率试验结束时逐只称重,计算相对增重率。以健康组鸡的平均增重率计为100%。
相对增重率(%)=感染各组鸡的平均增重/健康对照组鸡的平均增重×100%。
1.2.2.3 存活率存活率(%)=组内存活只数/组内参试鸡总数×100%。
1.2.2.4 病变记分参照Johnson等[11]的标准,剖检所有试验鸡,根据剖检后盲肠病变的严重程度,按5分制进行病变记分。具体记分办法参考表2。
1.2.2.5 病变值根据剖检后肠道病变的严重程度记分,参照Johnson等[11]的标准,做鸡的盲肠病变记分。病变值=每组试验鸡的平均病变记分×10。
1.2.2.6 卵囊值19日龄时结束试验剖杀所有的鸡,盲肠记分之后,收集各组鸡的全部盲肠(包括饲养期间因球虫死亡的鸡的盲肠),用剪刀将其剪碎,放到组织捣碎机中碾碎匀浆,捣碎时加水200mL,匀浆结束后立刻取1mL匀浆液,加入9mL饱和盐水,经充分搅匀后,再取1mL匀浆液,加入9mL饱和盐水稀释。然后用McMaster法计数,计算每克粪便卵囊数(OPG值),并按角田清的标准换算成卵囊值[12],换算方法见表3。