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【摘要】 目的：研究足细胞B7-1、尿nephrin在糖尿病肾病患者不同分期中的表达及其在预后评估中的价值。方法：选择笔者所在医院2016年2月-2018年2月治疗的糖尿病肾病患者50例，根据分期分为糖尿病肾病Ⅲ期（22例）、Ⅳ期（28例），选取糖尿病无合并肾损伤患者30例，作为糖尿病对照组，并抽取医院体检科健康体检者30例作为正常对照组，检测四组患者尿足细胞B7-1、尿nephrin的表达水平，同时观察糖尿病肾病尿足细胞B7-1、尿nephrin不同水平患者半年后eGFR的变化。结果：糖尿病肾病Ⅲ期组、糖尿病肾病Ⅳ期组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平均高于糖尿病对照组及正常对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。糖尿病肾病Ⅳ期组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平高于糖尿病肾病Ⅲ期组，差异有统计学意义（P<0.05）。糖尿病对照组及正常对照组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平差异无统计学意义（P>0.05）。糖尿病肾病组尿B7-1、尿nephrin高表达组eGFR降低幅度均大于糖尿病肾病组尿B7-1、尿nephrin低表达组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：足细胞B7-1、尿nephrin可作为糖尿病肾病患者早期诊断的重要指标，同时对糖尿病肾病患者的预后评估具有重要价值。
【关键词】 尿足细胞B7-1; 尿nephrin; 糖尿病肾病; 不同分期; 预后
doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.17.011 文献标识码 B 文章编號 1674-6805（2019）17-00-03
【Abstract】 Objective：To study the expression of podocyte B7-1 in different stages of diabetic nephropathy and its value in prognosis evaluation.Method：A total of 50 patients with diabetic nephropathy treated in our hospital from February 2016 to February 2018 were divided into stage Ⅲ（22 cases） and stage Ⅳ（28 cases）.30 patients with diabetes mellitus without renal injury were selected as diabetic control group.30 healthy persons from physical examination department of our hospital were selected as normal control group.The expression levels of urinary podocyte B7-1 and urine nephrin in four groups were detected，and the changes of eGFR in diabetic nephropathy patients with different levels of urinary podocyte B7-1 and urinary nephrin were observed half a year later.Result：The levels of urinary podocyte B7-1 and urinary nephrin in diabetic nephropathy stage Ⅲ group and diabetic nephropathy stage Ⅳ group were significantly higher than those in diabetic control group and normal control group（P<0.05）.The levels of urinary podocyte B7-1 and urinary nephrin in stage Ⅳ diabetic nephropathy group were significantly higher than those in diabetic nephropathy stage Ⅲ group（P<0.05）.There was no significant difference in urinary podocyte B7-1 and urine nephrin levels between diabetic control group and normal control group（P>0.05）.The decrease of eGFR in the urine of the diabetic nephropathy group was greater than that in the diabetic nephropathy group，and the urine nephrin low expression group was significantly higher than that of the diabetic nephropathy group（P<0.05）.Conclusion：Podocyte B7-1 and urinary nephrin can be used as important indicators for early diagnosis of diabetic nephropathy，and have important value for prognosis evaluation of diabetic nephropathy.
【Key words】 Urinary podocyte B7-1; Urinary nephrin; Diabetic nephropathy; Different stages; Prognosis
First-author’s address：Longgang District People’s Hospital of Shenzhen City，Shenzhen 510172，China
据统计，最近10年，糖尿病发病率呈明显上升趋势[1]。而糖尿病的最常见及最严重的并发症为微血管病变，临床上以糖尿病肾病尤为严重，且糖尿病肾病最终将进展至终末期肾病，需长期肾脏替代治疗。这直接影响了患者生活质量及生存寿命，并对家庭及社会造成了沉重的负担[2]。对于糖尿病肾病的防治，早期的预防和诊治尤为重要，如能早期干预，部分可防止进入终末期肾病。目前，糖尿病肾病的足细胞病变为研究的热点。而尿足细胞B7-1、尿nephrin的测定，作为糖尿肾病足细胞损伤的尿液标志物，为临床非侵入性诊断糖尿病肾病患者足细胞损伤提供可能[3]。本文将尿足细胞B7-1、尿nephrin纳入其中研究，观察其在不同分期中表达及其在预后评估中的价值，具体如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择笔者所在医院2016年2月-2018年2月治疗的糖尿病肾病患者50例，根据文献[2]Mogensen DN临床分期标准分为糖尿病肾病Ⅲ期（22例）、Ⅳ期（28例），选取糖尿病无合并肾损伤患者30例，作为糖尿病对照组，并抽取同期医院健康体检者30例作为正常对照组。所有研究对象均排除合并有恶性肿瘤、精神病、感染、心脑血管意外、临床资料不完善等。糖尿病肾病Ⅲ期组：男8例，女14例，年龄32～46岁，平均（39.95±4.26）岁;糖尿病肾病Ⅳ期组：男13例，女15例，年龄32～46岁，平均（39.42±4.34）岁;糖尿病对照组：男14例，女16例，年龄32～46岁，平均（39.43±4.12）岁;正常对照组：男15例，女15例，年龄32～46岁，平均（38.94±5.01）岁。四组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。患者均已签署相应知情同意书，此项目研究已经过通过医院医学伦理委员会审核。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 （1）采集四组入组者的血清，选清晨空腹（禁食水8 h）外周血采样。（2）采集四组入组者尿液标本：收集患者新鲜清晨空腹（禁食水8 h）中段尿10 ml，留取于洁净EP管中，立即于离心10 min（2 500 r/min），取标本上清液于Eppendorf管，立即存于-80 ℃冰箱。
1.2.2 观测指标的测定 （1）采用医院检验科全自动生化分析仪（由深圳市美思康电子有限公司生产，iChem-520），测定四组血清Cr、Urea、Alb水平。（2）采用ELISA方法测定四组的尿B7-1、尿nephrin水平。ELISA试剂盒购于酶联生物。按照说明书操作，记录数据。（3）四组入组者eGFR计算方法采用CKD-EPI肌酐公式进行，分别计算不同患者入组时及半年后的eGFR水平。
1.3 观察指标
观察四组患者足细胞B7-1水平、尿nephrin水平，并根据患者足细胞B7-1水平、尿nephrin水平將糖尿病肾病组分为尿B7-1高表达组、尿B7-1低表达组、尿nephrin高表达组、尿nephrin低表达组，观察四组患者半年后eGFR水平[4]。其中尿B7-1、尿nephrin高低表达的判定标准：尿B7-1高判定标准为≥1.70 IU/ml，低为<1.70 IU/ml;尿nephrin高判定标准为≥3.50 μg/L，低为<3.50 μg/L。
1.4 统计学处理
采用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，采用方差分析，组间两两比较采用q检验;计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 所有患者足细胞B7-1、尿nephrin检测情况比较
糖尿病肾病Ⅲ期组、糖尿病肾病Ⅳ期组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平均高于糖尿病对照组及正常对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。糖尿病肾病Ⅳ期组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平高于糖尿病肾病Ⅲ期组，差异有统计学意义（P<0.05）。糖尿病对照组及正常对照组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平差异无统计学意义（P>0.05），见表1、表2、表3。
2.2 不同尿足细胞B7-1、尿nephrin表达水平患者eGFR减低情况比较
糖尿病肾病组尿B7-1、尿nephrin高表达组eGFR降低幅度均大于糖尿病肾病组尿B7-1、尿nephrin低表达组，差异均有统计学意义（t=5.225、4.233，P=0.000、0.000），见表4。
3 讨论
糖尿病肾病是终末期肾病的重要病因，但目前对糖尿病肾病尚缺少特异性治疗[5]。糖尿病肾病Ⅲ期也称之为持续性微量白蛋白尿期，糖尿病肾病Ⅳ期则为显性蛋白尿期，临床上多以持续性大量蛋白尿为主要特征，而足细胞损伤是糖尿病肾病相应病变的首发因素，故此课题对尿B7-1、尿nephrin进行深入的研究[6]。
足细胞也被称为肾小球脏层上皮细胞，其属于肾小球中最大的细胞，位于肾小球基底膜的最外层，属于协同刺激分子[7]。足细胞B7-1在正常人肾脏足细胞中无表达，但在肾小球疾病患者及蛋白尿动物模型中，其表达上调。Yu等[8]发现2型糖尿病患者肾活检标本可检测到足细胞B7-1表现，且研究了B7-1在糖尿病肾病中的作用，证实采用阿巴西普治疗足细胞B7-1染色均为阳性的5例局灶性节段性肾小球硬化患者蛋白尿均得到完全或部分缓解，这说明阿巴西普通过阻断B7-1与β1整合素的相互作用，保护β1整合素的活性能够降低蛋白尿，具有治疗蛋白尿的作用。Garin等[9-10]研究也同时印证了这一点。Nehprin为足细胞表面的特异跨膜黏附蛋白。近年大量研究发现糖尿病肾病尿nephrin蛋白排泄增加，提示尿nephrin的测定可作为糖尿肾病足细胞损伤的标志物[11]。所以，肾脏足细胞病变时，可检出尿液中脱落足细胞的尿B7-1、尿nephrin表达。本文结果显示，糖尿病肾病Ⅲ期组、糖尿病肾病Ⅳ期组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平均高于糖尿病对照组及正常对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。糖尿病肾病Ⅳ期组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平高于糖尿病肾病Ⅲ期组，差异有统计学意义（P<0.05）。糖尿病对照组及正常对照组尿足细胞B7-1、尿nephrin水平差异无统计学意义（P>0.05）。糖尿病肾病组尿B7-1、尿nephrin高表达组eGFR降低幅度均大于糖尿病肾病组尿B7-1、尿nephrin低表达组，差异均有统计学意义（P<0.05）。故尿足细胞B7-1、尿nephrin在糖尿病Ⅲ期患者中可检出，对于早期糖尿病肾病的诊断具有举足轻重的作用。而在糖尿病肾病Ⅳ期患者中尿足细胞B7-1、尿nephrin水平表达水平更高。随访入组患者半年后情况，提示尿足细胞B7-1、尿nephrin的高表达患者eGFR下降更快，提示糖尿病肾病患者足细胞病变程度，预示着病情的进展。尿足细胞B7-1、尿nephrin可作为糖尿病肾病患者预后的监测指标。钟正霞等[12]发现原发性肾病综合征患者尿液中可检测到B7-1表达，且与预后具有相关性，这与本课题组的研究结论相符合。
综上所述，尿nephrin、足细胞B7-1可以作为糖尿病肾病患者早期诊断的重要指标，同时尿nephrin、足细胞B7-1对糖尿病肾病患者的预后有评估作用。而目前对于尿nephrin的研究较多，但足细胞B7-1的研究仍需进一步深入。尿足細胞B7-1有望通过进一步研究，在临床检测中得到广泛应用。
参考文献
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（收稿日期：2019-04-08） （本文编辑：马竹君）