[摘要] 目的 探究乳腺浸润性导管癌组织中PHH3和Ki-67的表达及其临床意义。方法 方便选取该院2014年11月—2017年11月收治的31例乳腺浸润性导管癌患者为研究对象，为研究组；并将同期收治的另外31名正常乳腺组织者设为对照组，对其一般资料进行回顾分析。结果 研究组的PHH3阳性表达率为70.97%，Ki-67阳性表达率为61.29%，明显高于对照组的9.68%、6.45%（P<0.05）；且研究组的PHH3、Ki-67表达跟淋巴结转移、TNM分期、肿瘤组织学分级相关，预后效果较差。结论 PHH3、Ki-67表达跟乳腺浸润性导管癌组织发生、发展相关，可为临床治疗及预后效果评价提供理论依据。
[关键词] 乳腺浸润性导管癌组织；PHH3；Ki-67；表达；临床意义
[中图分类号] R739 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2018）04（c）-0040-03
Study on Expressions of PHH3 and Ki-67 and Clinical Significance in the Breast Infiltrating Ductal Carcinoma Tissues
HUANG Jiang-sheng， DENG Wei， YANG Chun-mei， WANG Ping
Department of Pathology， Kunshan Hospital of TCM Affiliated to Nanjing University of TCM， Kunshan， Jiangsu Province， 215300 China
[Abstract] Objective To study the expressions of PHH3 and Ki-67 and clinical significance in the breast infiltrating ductal carcinoma tissues. Methods 31 cases of patients with breast infiltrating ductal carcinoma tissues admitted and treated in our hospital from November 2014 to November 2017 were selected as the research group， while 31 cases of patients with normal breast tissues at the same period were selected as the control group， and the general data were analyzed. Results The PHH3 positive expression rate and Ki-67 positive expression rate in the research group were obviously higher than those in the control group（70.97%， 61.29% vs 9.68%， 6.45%）（P<0.05）， and the expressions of PHH3 and Ki-67 in the research group were related to the lymphatic metastasis， TNM staging and histological grade of tumor， and the prognosis effect is worse. Conclusion The expressions of PHH3 and Ki-67 are related to the occurrence and development of breast infiltrating ductal carcinoma tissues， which can provide theoretical basis for the clinical treatment and evaluation of prognosis effect.
[Key words] Breast infiltrating ductal carcinoma tissues； PHH3； Ki-67； Expression； Clinical significance
乳腺癌為临床上常见的妇科恶性肿瘤，近些年来，该病症发病率呈现出逐年上升的趋势。而浸润性导管癌为乳腺癌症中较为常见的一种组织学类型，约占乳腺癌的70%。从浸润性导管癌的发生机制看，主要跟肿瘤细胞的无线增殖、自主分裂相关，所以，需要对关键性指标进行有效测量，从而更好的分析患者的病情发展状况，并为诊治、预后评定提供可靠依据[1]。该文主要研究乳腺浸润性导管癌组织中PHH3和Ki-67的表达及其临床意义，并将该院2014年11月—2017年11月收治的31例乳腺浸润性导管癌患者作为该次研究对象，并将结果报道如下。
1 对象与方法
1.1 研究对象
方便选取该院收治的乳腺浸润性导管癌患者31例纳入该次研究，设为研究组。所有患者均行手术切除治疗，且经过伦理委员会批准，患者及家属均签署知情同意书。其年龄在46～80岁，平均年龄为（52.3±3.06）岁；肿瘤直径在1.6～6.2 cm，平均直径为（3.1±0.12）cm；依据组织学分级，I级占8例，Ⅱ占13例，Ⅲ级占10例。合并有腋窝淋巴结转移者共有17例。依据国际抗癌联盟（UICC）TNM标准，I期共有14例，Ⅱ期有9例，Ⅲ期有5例，Ⅳ期有3例。另外，将同期收治的31名癌旁正常乳腺组织者设为对照组，其年龄在54～79岁，平均年龄为（51.6±3.21）岁，其组织学结构均正常。所有研究对象均未在术前接收过放疗、化疗、抗雄激素等治疗。两组研究对象在性别、年龄等一般资料上比较差异无统计学意义（P>0.05）。
1.2 方法
將兔抗人多克隆抗体RAB-0693型作为免疫组化试剂PHH3；用鼠抗人单克隆抗体MAB-0672型为Ki-67试剂。采用免疫组化MaxVision两步法，对研究组、对照组乳腺组织中的PHH3、Ki-67表达予以检测，并对研究组的病理特征、预后关系进行分析。所有标本均采用10%的中性福尔马林予以固定，且用石蜡包埋，连续切片，厚度为4 μm。在操作过程中，需要按照试剂盒说明书的相关步骤进行，并已知阳性切片为阳性对照，用PBS代替一抗为阴性对照。
1.3 效果评定
记录两组乳腺组织内的PHH3、Ki-67表达，两者阳性表达皆定位在细胞胞核，其中，当细胞核内存在黄色颗粒沉淀物时，可视为阳性细胞。在判定时，要使用高倍镜对计数10个视野内的阳性细胞占比予以记录，PHH3的阳性细胞≥10%表示高表达，阳性细胞<10%表示低表达；Ki-67的阳性细胞≥20%为高表达，反之则为低表达。
1.4 统计方法
该研究涉及到的数据均用SPSS 19.0统计学软件予以处理，计数资料用[n（%）]表示，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 组间乳腺组织表达水平比较
对照组PHH3高表达有3例，阳性率为9.68%，Ki-67高表达有2例，阳性率为6.45%；而研究组的PHH3高表达有22例，阳性率为70.97%，Ki-67高表达有19例，阳性率为61.29%；经比价发现，研究组的PHH3、Ki-67阳性表达明显高于对照组，且在细胞核内均呈黄色（χ2=24.196 8、20.810 7，P<0.05）。
2.2 乳腺浸润性导管癌病理特征与PHH3、Ki-67表达关系
通过对研究组患者的PHH3、Ki-67表达进一步研究后发现，其表达水平跟淋巴结转移、TNM分期、肿瘤组织学分级相关（P<0.05）；但与肿瘤直径、患者年龄无关，见表1。
2.3 PHH3、Ki-67表达与预后关系
在31例研究组患者中，所有患者通过治疗后2年随访，发现有6例患者死亡，且患者均为PHH3、Ki-67高表达，说明 PHH3、Ki-67表达水平，跟乳腺浸润性导管癌预后效果有密切联系，其阳性表达率越高，则预后效果越差。
3 讨论
乳腺浸润性导管癌的发生、发展与多种因素相关，且包含了不同的可能机制，而不同的机制又会直接或是间接的对正常细胞周期造成影响。产生恶性肿瘤，主要是由于肿瘤细胞无限制的增殖、自主分裂。因此，对其瘤细胞的具体增殖状况进行有效测量，可以更好的协助诊断，并对预后效果进行评价，从而为临床治疗提供可靠的依据[2-4]。
Ki-67为增殖细胞核抗原，其蛋白主要由相对分子质量为3.58×104及3.19×104的多肽链构成，基因位于10号染色体上，一般在G1晚期存在表达，并在S期、G2期表达逐渐增多，到M期时达到顶峰。Ki-67不仅在乳腺浸润性导管癌中有着较高的表达，在其他多种恶性肿瘤中均有着较高的表达，可以有效反映出细胞增殖活性，并用于检测肿瘤细胞的增殖状况，对其预后效果予以评价[5]。Ki-67表达与增殖细胞相关，且广泛存在于细胞核基质核抗原内，不仅可以在静止期细胞内检出，且可能在增殖细胞相关周期活动期内检出[6-7]。在该研究中，研究组患者的组织内Ki-67表达水平，明显要高于对照组，组间差异有统计学意义（P<0.05）。另外，在该组研究中，研究组患者的Ki-67高表达，主要与高组织学分级、高TNM分期以及是否存在淋巴结转移相关，但与患者的年龄以及肿瘤直径无明显的关系（P<0.05）。且其Ki-67表达，与淋巴结转移、高组织学分级、高TNM分期呈正比例关系。
磷酸化组蛋白H3（PHH3）为最新发现的5个核心组蛋白之一，在真核细胞内跟其它的组蛋白一同组成了染色质中关键性的蛋白组分。PHH3表达通常可在核分裂期间达到最大值，为核分裂特异性标志物之一，是公认的肿瘤细胞核分裂象。在该研究中，发现研究组患者的PHH3高表达率较对照组明显增高，组间差异有统计学意义（P<0.05），表明PHH3表达状况跟乳腺浸润性导管癌的发生、进展等有密切的关联，且其表达跟组织学分级为正比例关系。也就是说，患者的组织学分级越高，则其阳性表达率也越高。同时，从研究结果可看出，PHH3表达，跟淋巴结是否转移、高TNM分期等相关，与王文超等[8]研究结果相符（P<0.05）。因此，可通过检测PHH3表达，来对淋巴结转移状况、预后治疗效果进行评价。而对PHH3在乳腺浸润性导管癌组织内的表达进行抑制，极有可能对该病症的进展、淋巴结远处浸润转移等产生良好的阻碍作用，能够在一定程度上提升预后效果，并提高患者的生存率，可以为新治疗方案的研制提供新的思路。
综上所述，PHH3、Ki-67表达跟乳腺浸润性导管癌的发生与进展有密切的联系，是其主要蛋白之一，结合PHH3、Ki-67在乳腺浸润性导管癌组织内的表达，可以对其病理分级、预后效果进行有效判断，并为临床治疗提供可靠依据，有利于合理治疗方案的制定。
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（收稿日期：2018-01-22）