[摘要] 目的 了解我院血培养中的革兰阴性（G-）杆菌的分布及对常用抗生素的耐药情况，为合理使用抗菌药物提供依据。方法 采用法国梅里埃的Bact/ALERT 3D 60血培养仪和美国BD公司PHOENIX 100全自动细菌鉴定分析仪进行培养鉴定和药敏实验。 结果 分离到的G-杆菌中，主要有大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亚种、铜绿假单胞菌等，大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、亚胺培南（IPM）、阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）的耐药率均＜10%；肺炎克雷伯菌肺炎亚种对阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）、亚胺培南（IPM）的耐药率分别为10.5 %、7.9%、5.3%；铜绿假单胞菌对庆大霉素（GM）、多粘菌素（CL）的耐药率分别为5.0%、0.0%。三种常见分离菌对其余抗生素耐药率都相对较高，有的甚至已经100%耐药。结论 本院血培养中分离出的常见三种G-杆菌中耐药率严重，应引起临床重视，必须严格合理用药。
[关键词] 血培养；革兰氏阴性杆菌；抗生素；耐药性
[中图分类号] R446.5[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2014）16-0076-03
Analysis of the main gram negative bacteria distribution and drug resistance of blood culture in our hospital in 2013
QIU Zhongliu ZENG Fengqun FENG Lichun CHEN Shihao
Department of Clinical Laboratory, Xinhui Hospital Affiliated to Southern Medical University, Xinhui 529100, China
[Abstract] Objective To understand the gram negative blood culture in our hospital(G-) bacteria distribution and resistance to antibiotics, provide the basis for the rational use of antimicrobial agents. Methods The French bioMerieux Bact/ALERT 3D 60 blood culture system and American BD PHOENIX 100 automatic bacteria identification instrument culture identification and drug sensitive experiment. Results Isolated strains of G- bacteria, mainly Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli sensitive antibiotic piperacillin/ tazobactam (TZP), imipenem (IPM), Amikacin(AN), meropenem(MEM), the resistance rate of less than 10%. Amikacin was sensitive to the Klebsiella pneumoniae subspecies(AN), meropenem(MEM), imipenem (IPM), resistance rates were 10.5%, 7.9%, 5.3%, gentamicin was sensitive to the Pseudomonas aeruginosa(GM), polymyxin hormone(CL), resistance rates were 5.0%, 0.0%. Three kinds of common bacteria isolated from the rest of the antibiotic resistance rate was relatively high, and some even had 100% resistance. Conclusion The blood culture isolate three common resistant G- coli rate is serious, should cause clinical attention, must strictly rational drug use.
[Key words] Blood culture; Gram negative bacteria; Antibiotics; Drug resistance近年来，由于各种抗生素、免疫抑制剂和各种侵袭性操作与治疗的应用，使机体的防御功能明显下降，导致各种由条件致病菌所致的败血症、菌血症等几率大大增加[1]。及时准确地诊断菌血症可以减少抗菌药物的误用和滥用。血培养病原菌中占主要的是G-杆菌，其耐药的广泛性和多重性已成为临床治疗和控制院内感染的突出问题[2]。随着病原菌分布不断地发生变迁，对抗菌药物的耐药性也不断地发生改变。同时不同地区和不同时期血培养病原菌的分布及耐药率均会有所不同。为了解本院血培养分离菌中G-杆菌的分布及对常用抗生素的耐药情况，特对2013年送检本院细菌室的3524例血培养标本结果进行分析，以其能为临床合理使用抗菌药物提供参考依据，有效控制血流感染疾病。
1 资料与方法
1.1菌株来源
2013年1～12月间送检我院细菌室的血培养标本中分离出来的G-杆菌。
1.2仪器与试剂
采用Bact/ALERT 3D 60血培养仪及其配套的培养瓶；细菌鉴定和药物敏感试验采用美国BD公司PHOENIX 100全自动细菌鉴定分析仪。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853
1.3方法
由临床护士抽取患者静脉血注入Bact/ALERT 3D专用培养瓶中进行培养，报警阳性后接种分离。所分离菌株通过菌落形态、革兰染色镜检、氧化酶等定向试验后，采用BD PHOENIX NMIC/ID-4鉴定药敏组合板进行鉴定及药敏。
2 结果
2.1病原菌的分布
2013年我院细菌室共从3524份送检血标本中分离出487例阳性标本，阳性率为13.8%。其中杆菌313例，球菌158例，真菌16例。杆菌检出率在前三位的为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亚种、铜绿假单胞菌，在所有分离的阳性标本中百分率分别为22.6%、15.6%、8.2%；在杆菌中的百分率分别为35.1%、24.3%、12.8%。球菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌。见表1。
2.2主要G-杆菌耐药率
大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、亚胺培南（IPM）、阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）的耐药率均＜10%；对头孢他啶（CAZ）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）的耐药率＜40%；对头孢吡肟（FEP）、氨苄西林（AM）、哌拉西林（PIP）、四环素（TE）、复方磺胺（SXT）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、头孢匹美（FEP-30）、庆大霉素（GM）、头孢噻肟（CTX）、环丙沙星（CIP）、左旋氧氟沙星（LVX）、氯霉素（C）、氨曲南（ATM）的耐药率＞40%甚至达到100%。肺炎克雷伯菌肺炎亚种对阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）、亚胺培南（IPM）的耐药率分别为10.5 %、7.9%、5.3%；对左旋氧氟沙星（LVX）、复方磺胺（SXT）、庆大霉素（GM）、氯霉素（C）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）的耐药率＜40%；对四环素（TE）、环丙沙星（CIP）、头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CTX）、氨曲南（ATM）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）、头孢匹美（FEP-30）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、哌拉西林（PIP）、头孢吡肟（FEP）、氨苄西林（AM）的耐药率＞40%甚至100%。铜绿假单胞菌对庆大霉素（GM）、多粘菌素（CL）的耐药率分别为5.0%、0.0%；对环丙沙星（CIP）、左旋氧氟沙星（LVX）、亚胺培南（IPM）、哌拉西林（PIP）、氨曲南（ATM）、头孢他啶（CAZ）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）的耐药率＜40%；对头孢匹美（FEP-30）、头孢吡肟（FEP）、氨苄西林（AM）、四环素（TE）、复方磺胺（SXT）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、头孢噻肟（CTX）、氯霉素（C）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）的耐药率＞40%甚至100%。见表2。
表2 2013年血培养主要革兰阴性杆菌对抗生素耐药率
注：A：大肠埃希菌；B：肺炎克雷伯菌肺炎亚种；C：铜绿假单胞菌；（）内为菌株数
3 讨论
2013年1～12月送检本院细菌室的3524份血培养标本中检出病原菌487株，阳性率为13.8%，与国内其他医院报道[3-5]的基本一致。菌株以杆菌为主，占64.3%；球菌次之，占32.4%；此外还有少量真菌。杆菌中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亚种、铜绿假单胞菌为主，分别占35.1%、24.3%、12.8％，与国内文献报道[6,7]一致；球菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌。
大肠埃希菌的致病机制繁多，由质粒介导产超广谱β-内酰胺酶是其最常见的耐药机制，这主要与这些年头孢类抗菌药物大量使用有关[8]。本次监测显示哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、亚胺培南（IPM）、阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）对大肠埃希菌抗菌活性最强，耐药率均＜10%，可作为经验治疗的首选用药。对头孢他啶（CAZ）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）的耐药率在30%～40%之间；对其余12种抗生素的耐药率＞40%甚至达到100%，已经基本不适合使用。肺炎克雷伯菌肺炎亚种对阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）、亚胺培南（IPM）的耐药率分别为10.5%、7.9%、5.3%；对复方磺胺（SXT）、庆大霉素（GM）、氯霉素（C）的耐药率均为28.9%，哌拉西林/他唑巴坦（TZP）为26.3%；对头孢匹美（FEP-30）、头孢噻肟（CTX）、氨曲南（ATM）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）、四环素（TE）、环丙沙星（CIP）、头孢他啶（CAZ）、左旋氧氟沙星（LVX）的耐药率在40%～50%之间；氨苄西林（AM）、头孢吡肟（FEP）、哌拉西林（PIP）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）＞50%甚至100%。铜绿假单胞菌引起的医院内感染较为普遍，且治疗困难，常形成多重耐药株，其对庆大霉素（GM）、多粘菌素（CL）的耐药率分别为5.0%、0.0%；对哌拉西林（PIP）、氨曲南（ATM）、头孢他啶（CAZ）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、阿米卡星（AN）、美洛配能（MEM）的耐药率在20%～30%之间；对头孢匹美（FEP-30）、环丙沙星（CIP）、左旋氧氟沙星（LVX）、亚胺培南（IPM）的耐药率在35%～50%之间；对氨苄西林（AM）、四环素（TE）、复方磺胺（SXT）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、头孢噻肟（CTX）、氯霉素（C）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）100%耐药。对头孢吡肟（FEP）的耐药率为85.0%。
由以上数据可以看出，本院血培养分离的病原菌种类分布较广，病原菌以G-杆菌居多且耐药严重。微生物室应加强血培养中G-杆菌及其耐药性监测，定期分析病原菌的分布和耐药性，并根据监测结果采取相应措施，以便临床及时、准确、合理用药。临床医生应该更加重视对疑似败血症患者及时进行血培养，尽量根据血培养结果正规足量应用敏感的抗生素，最大限度地减少临床用药盲目性，以减少耐药菌株的产生，尤其是多药耐药株的出现和传播。
[参考文献]
[1]杨敬芳，李继红，王鑫，等． 6445份血培养分离菌的分布特征及耐药谱型研究[J]． 中华医院感染学杂志，2003， 13（6）：575-577．
[2]王潭枫，符永玫，滕奔琦. 血培养中革兰氏阴性杆菌的分布及耐药性分析[J]. 国际医药卫生导报，2012，14（6）：76-78.
[3]袁星，沈继录，徐元宏． 近5年血培养中细菌分布及耐药性分析[J]． 临床输血与检验杂志，2010，12（3）：211-215．
[4]邱付兰，钟荣荣． 6020份血培养病原菌的耐药性分析[J]．检验医学与临床，2010，7（20）：2245-2247．
[5]汤贝贝，何贵元，曹阳，等． 2256份血培养标本病原菌分布及耐药性分析[J]． 国际检验医学杂志，2010，31（11）：1326-1327．
[6]黎红，朱以军，徐瑞龙，等． 综合性医院6年血培养病原菌分布及耐药性变迁[J]． 中华医院感染学杂志，2010， 20（14）：2137-2140．
[7]夏玉珍． 2002～2009年医院感染病原菌及耐药分析[J]．齐鲁护理杂志，2011，17（30）：120-122．
[8]王贺，徐英眷，陈民钧． 细菌质粒介导的喹诺酮类抗菌药物耐药机制研究进展[J]． 中华医院感染学杂志，2007，17（5）：618．
（收稿日期：2014-02-14）