胎儿骨骼染色透明标本的设计与制作

摘要:目的 通过透明标本的制作,对胎儿体内整体骨骼结构的位置关系及形态进行观察和分析。方法 应用氢氧化钾溶液先对预先处理好的胎儿标本进行透明处理,再应用茜素红对胎儿硬骨及骨钙化点进行染色,最后通过各级甘油的应用来脱去肌肉浮色,使组织透明。结果 经过一系列的处理后,胎儿机体软组织呈现无色透明特点,其中硬骨及骨钙化点均被成功的染成红色,而且骨骼界限也尤为清晰。结论 胎儿骨骼染色透明标本的设计与制作,是当前通过非传统解剖法对胎儿体内整体骨骼结构的位置关系及形态进行直接观察和分析的有效手段,在临床有着广泛的应用和意义。

关键词:胎儿;透明标本;骨骼染色;设计;制作

透明标本的制作,就是在对机体组织处理过程中,通过一些物理方法和化学药品的应用,使组织的折射率达到与周围介质和透明剂相似的要求,从而达到透明的目的。而胎儿骨骼染色标本的设计与制作,也就是通过应用相应的物理方法和化学制剂,实现在保证胎儿完整外形结构的前提下,使其软组织的折光率能够同周围介质与透明剂相近。胎儿骨骼染色透明标本,为现代医学教学提供出了一套最直观的标本资料,在对胎儿各期骨骼发育情况进行观察和学习的过程中发挥出了重要的参考意义。

1 资料与方法

1.1材料 在制作过程中主要应用的材料有:以浓度系数为10%的甲醛溶液为固定液;浓度为6%的过氧化钠溶液为漂白剂,并用浓度系数分别为50%、70%、90%、95%的酒精为脱水剂;透明剂采用浓度系数为4%的氢氧化钾溶液,其中应用的染色液有2g氢氧化钾、0.04g的茜素红以及100g的蒸馏水。同时在制作过程中还需一孕育4w左右的男性新鲜胎儿尸体。

1.2清洗 在正是操作之前,首先对胎体表面的血迹、污垢利用清水做清洁处理,并在冲洗过程中同时对胎儿的胸腔和腹腔进行挤压,以便存在于胎儿体内的内容物都能顺利排出,但为了保证胎儿整体的完整性,在操作过程中要保留胎儿的内脏及脑组织。

1.3排血 在整个标本制作过程中,排血操作做为了一项最重要的基础环节。在排血操作过程中,首先在胎儿的胸骨柄处切开一口,以成功找到胎儿的心脏及各大出入血管,切开下腔静脉,促使胎儿排血;而后对胎儿肺动脉和主动脉起始端进行结扎,在动脉中进行肝素溶液的连续注射,直到胎儿静脉流出的肝素溶液呈现无色即可停止注射操作。

1.4固定 固定好胎儿姿势,并将其保持该姿势置入浓度为10%的甲醛溶液中进行固定浸泡,浸泡时间为5d。

1.5漂白 将经过浸泡的胎儿标本取出,并用清水进行连续12h的冲洗,再将冲洗过后的胎儿标本放置到浓度为6%的过氧化氢溶液中进行为期3~4d的浸泡,进行漂白处理,进而成功去除胎儿组织中的污物和色素。

1.6脱水 经过漂白处理之后,再将胎儿标本用清水进行12h的清洗,随后再将清洗后的标本置入不同浓度的酒精中进行脱水处理,从低浓度等级向高浓度等级依次进行,每一浓度等级中进行5d的浸泡。在脱水处理过程中可用针头扎标本,以利于胎儿脱水的更有效进行,也便于标本的透明。

1.7透明 利用浓度为4%的氢氧化钾溶液,并在结合胎儿标本具体大小的基础上进行透明处理,溶液每隔2~3d进行一次更换,直至胎儿组织完全透明。

1.8染色 将完全透明的标本置入染色液中进行为期3~5d的染色处理,直到胎儿硬骨及骨钙化点被成功着色后即可立即取出标本,以避免出现肌肉的过度染色。

1.9软组织脱色 将处理好的胎儿标本放置入各级甘油中进行软组织脱色处理,同脱水处理一样,从低浓度向高浓度依次进行,每一浓度级进行为期2d左右的脱色,直至机体软组织浮色成功去除即可完成。

1.10二次透明 将经过软组织脱色处理后的胎儿标本放入甘油中进行二次透明处理,在处理过程中对于肌肉较厚的部位可采取人工注入甘油的方法来强化透明效果。

1.11保存 最后,对处理好的胎儿骨骼染色透明标本进行整理和修饰,所有整理工作结束后,将其放入冬青油中进行密封保存。

2 结果

经过一系列的处理过程而完成的胎儿染色透明标本,胎儿机体软组织呈现无色透明特点,其中硬骨及骨钙化点均被成功的染成红色,而且骨骼界限也尤为清晰,更加便于观察和识别。实现了在保证胎儿整体外部结构完整的情况下,能够更加精准直观的观察其内部的骨骼结构位置和形态特征。

3 讨论

3.1 在标本制作过程中的注意事项

3.1.1在制作过程中所应用到的胎儿材料要确保足够新鲜,便于透明和排血处理。因为如果胎儿标本放置时间过长,都会由于凝血原因导致血管堵塞,进而对冲洗机排血等过程带来极大地不便[1-4]。

3.1.2漂白和脱水作为标本制作过程中的两大关键环节,在具体的实施过程中要确保标本不被破坏的前提下进行充分的漂白;另外,漂白液浓度的提高,虽然会缩短漂白时间,但也会造成组织损伤,因此为更好的确保标本外形的完整性,通常会采取较低浓度的漂白液。对于脱水处理过程,经过脱水处理后的胎儿标本,能够更好地实现透明剂的渗入,进而达到透明充分的目的。但同时由于较高浓度酒精所具备的渗透速度快、脱水能力强等特点,会导致标本出现明显的收索硬化进而损坏胎儿外形,因此在脱水环节,通常采取逐级脱水的方法,以此有效的避免了标本的外形改变,并充分的保证了胎儿的外部形态的完整性。

3.1.3由于胎龄越大,质量越重,身体结实度越强,相应的溶液融入也就越困难,因此在透明处理过程中要结合胎儿的具体年龄、质量以及坚实程度等特点进行透明剂氢氧化钾的选取,避免由于溶液浓度过高而造成标本的腐蚀。

3.1.4染色液浓度和染色时间也要根据材料的大小进行确定。在染色过程中要保持紧密的观察,对于染色时间及染色程度进行准确的把握,避免染色过度现象的发生。

3.2胎儿骨骼染色透明标本的作用分析 在传统的教学模式中,只是单纯的局限于对传统理论及解剖实验的讲解,对于在保持机体完整状态下进行的骨骼结构形态观察严重缺乏,因此对学生的学习带来了极大地不便。胎儿骨骼染色透明标本的设计及制作,为现代胚胎学的医学影像学研究和骨骼学研究以及解剖学研究等方面,提供出了一套直观真实的形态学资料。并在实践教学中,通过同临床影像学资料的对比,使得教学手段得到了极大的丰富,有效的提高学生们的学习积极性,并促使其对于胎儿骨骼结构的位置关系和形态有了一更为直观的认识,有效的提高了教学效果;除此之外,该透明标本还能够长期保存,可供展览使用。

参考文献:

[1]杨小龙,王志超,王胐胐,等.胎儿全身动脉血管铸型透明标本的设计与制作[J].医学信息(上旬刊),2011,07:4521.

[2]侯鹏高.人体透明标本制作技术及研究进展[J].齐齐哈尔医学院学报,2012,23:3264-3266.

[3]涂甸珍,杨兵,涂勤.浅谈一种制作透明胎儿标本的方法[J].四川解剖学杂志,2014,02:67-69.

[4]刘万胜,黄明辉,刘力华.新生儿骨骼染色透明标本的制作方法[J].卫生职业教育,2004,14:92.编辑/金昊天