5种野生仁用核果种仁油脂含量和成分分析

　　摘要：以李亚科的矮扁桃（Amygdalus nana）、长梗扁桃（Amygdalus pedunculata）、蒙古扁桃（Amygdalus mongolica）、光核桃（Amygdalus mira）、山杏（Armeniaca sibirica）等5种野生资源种仁中油脂含量和成分为研究对象，按照国标GB/T 5512—2008索氏抽提法对种仁油粗脂肪含量进行测定。结果显示，矮扁桃、长柄扁桃、蒙古扁桃、光核桃、山杏的种仁含油量分别为49.54%、49.10%、52.50%、46.38%、49.82%。采用超临界CO2萃取技术萃取种仁油，用三氟化硼法对植物油进行甲酯化处理，采用气质联用色谱仪（GC-MS）对种仁油的脂肪酸组成进行分析。经对比分析，长柄扁桃种仁油饱和脂肪酸含量最低，为3.6%；不饱和脂肪酸含量最高，为95.82%。
　　关键词：木本油料；矮扁桃；长柄扁桃；蒙古扁桃；光核桃；山杏；脂肪酸
　　中图分类号： S662.01 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0317-03
　　油脂既是人们食物的重要组成部分，又是食品、医药、化妆和保健等行业的重要原料。世界植物油脂产量占世界油脂总产量70%左右，其中食用油占80%左右，非食用油约占20%[1]。仁用核果类作为木本油料中的一部分，具有含油量高、油的品质好、种植范围广、种植面积大等特点，已经成为高品质油的重要来源。大力发展木本粮油产业，可以改善人们的膳食结构，提高人们的健康水平。本研究主要针对木本油料中的矮扁桃、长柄扁桃、蒙古扁桃、光核桃和山杏5种野生仁用核果类植物油进行研究，通过索氏抽提法对种仁油进行粗脂肪测定，以确定各品种含油量；采用超临界CO2萃取技术萃取种仁油，用三氟化硼法对植物油进行甲酯化处理，并采用 GC-MS 技术对种仁油的脂肪酸组成进行了分析，比较各品种脂肪酸含量，为进一步开发利用提供理论参考和依据。
　　1 材料与方法
　　1.1 试验原料及试剂
　　本试验所使用的5种野生仁用核果种仁采集地点及地理位置见表1；石油醚（沸程30～60 ℃），天津市致远化学试剂有限公司；食品级（>99.99%）液体CO2，郑州市超凡化工产品有限公司；分析纯氢氧化钠，国药集团化学试剂有限公司；一级色谱纯甲醇，河北四友卓越科技有限公司；分析纯正己烷，天津致远化学试剂有限公司；分析纯氯化钠，国药集团化学试剂有限公司；分析纯无水硫酸钠，天津致远化学试剂有限公司。
　　1.2 试验设备
　　BPG-9070A型精密鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；XL-08B型400 g密封型摇摆式粉碎机（广州旭朗机械设备有限公司）；0.1 cm网筛（市售）；圆形化学分析滤纸（抚顺市民政滤纸厂）；500 mL/24型索氏提取器（四川蜀牛玻璃仪器有限公司）；HH-8型数显恒温水浴锅（郑州元强仪器设备有限公司）；RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；AL204型电子天平（梅特勒-托利多上海仪器有限公司）；SFE5000超临界CO2萃取装置（美国沃特斯公司）；DC-0515低温恒温槽（上海衡平仪器仪表厂）；SY-X循环浴（郑州长城科工贸有限公司）；HP-88型GC-MS联用仪（美国安捷伦科技有限公司）；220 V、2 kW电炉（北京凯亚仪器有限公司）。
　　1.3 试验方法
　　1.3.1 种仁粗脂肪的测定含油量测定参照GB/T 5512—2008粮食中粗脂肪含量测定的方法[2]。将采集的种子置于阴凉环境下自然风干，之后破壳，在105 ℃条件下烘干，粉碎后过0.1 cm网筛备用。将处理过的样品包在滤纸筒中，放入索氏提取器，用石油醚为溶剂，料液比为1 g ∶ 9 mL，65 ℃水浴提取12 h 左右，直至取1滴在滤纸上无油滴为止，然后放在旋转蒸发仪上蒸去石油醚，残余的油状液体放在105 ℃的烘箱中烘干2 h，取出放在干燥器中，至恒质量。设置空白对照试验，每个试样平行测定3次。结果计算：
　　w=m2-m1m×100%。
　　（1）
　　式中：w代表含油量（%）；m代表试样质量（g）；m1代表空烧瓶质量（g）；m2代表烧瓶与油样总质量（g）。
　　1.3.2 超临界CO2萃取本试验的操作参照JB/T 20136—2011标准[3]进行。称取粉碎过筛后的样品粉150 g，置于 500 mL 的萃取釜中，按照设定条件进行萃取。设定条件为CO2流量24 L/h、粉碎粒度60目、萃取压35 MPa、萃取温度50 ℃、萃取时间2 h[4]。
　　1.3.3 油脂的甲酯化油样的甲酯化采用GB/T 17376—2008中的三氟化硼法[5]。取大约2滴油样于50 mL圆底烧瓶中，取7 mL 0.5 mol/L NaOH-CH3OH溶液于油样中，并加入转子，连接回流装置，90 ℃加热回流。当烧瓶内的油珠消失，溶液变得透明时（大约5～10 min），用移液管从冷凝器上端加7 mL 14% BF3-CH3OH溶液于烧瓶内，继续回流 1 min。然后从冷凝管上端加入3 mL正己烷，再继续回流 1 min。撤离火源，取出烧瓶，向烧瓶中加入一定量的饱和NaCl溶液，轻轻振荡，静置分层。从烧瓶内的上层溶液中吸取1 mL于试管中，并加入适量的无水硫酸钠，以除去痕量的水分，得到的此甲酯化样品以备气相色谱分析用。
　　1.3.4 油脂脂肪酸的测定将甲酯化处理过的样品，利用GC-MS联用仪进行气相色谱分析。气相色谱分析参照 GB/T 17377—2008[6]。色谱条件：进样量为1 μL，色谱柱（60 m×250 μm×0.2 μm），分流比100 ∶ 1；柱温采用三级程序升温：120 ℃保持 1 min，以10 ℃/min升温到175 ℃保持10 min，再以5 ℃/min升温到210 ℃保持5 min，再以 10 ℃/min 升温到230 ℃，保持5 min。氢火焰离子化检测器（FID），载气：高纯 N2（>9999%）；氮气流速1 mL/min，H2流速40 mL/min，空气流速40 mL/min。进样口温度250 ℃，检测器温度270 ℃。