摘要：以杜仲籽为原料，采用有机溶剂浸提与水蒸气蒸馏组合的方法提取杜仲籽油，在单因素试验的基础上，采用Box-Behnken中心组合设计原理设计4因素3水平试验优化杜仲籽油的提取工艺。结果表明，采用有机溶剂浸提与水蒸气蒸馏组合法提取杜仲籽油的最佳条件为：样品粒度>80～100目，超声处理时间15 min，料液比1 g ∶7 mL，蒸馏时间4 h，在此条件下杜仲籽油的提取率为2026%。
关键词：杜仲籽油；有机溶剂；水蒸气；提取工艺
中图分类号： TS2244文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2017）21-0216-03
收稿日期：2016-05-24
基金項目：陕西省教育厅项目（编号：14JK2017）；陕西国际商贸学院校级科研课题（编号：SMXY201634）。
作者简介：赵欣（1985—），女，重庆梁平人，硕士，讲师，主要从事中药材鉴定以及质量标准方面的教学与科研工作。E-mail：zx420355@163com。
杜仲（Eucommia ulmoides Oliver）是我国特有的经济树种和名贵中药材，又名思仲、思仙等，为杜仲科杜仲属多年生落叶乔木，属被子植物门杜仲科杜仲属，为一科一属落叶乔木，广泛分布于四川、陕西、湖北、河南、贵州、云南、江西、甘肃、湖南及广西等地区1]。杜仲籽是杜仲种植业的副产品。杜仲籽油中90%以上脂肪酸为不饱和脂肪酸，其中亚油酸占 11%～13%，α-亚麻酸占61%～63%，杜仲籽油是目前发现的高α-亚麻酸天然植物油之一2-4]。亚油酸和α-亚麻酸5]均是人体必需脂肪酸6-7]，因此杜仲籽油在食品、药品及化妆品行业具有广阔的开发前景8]。
目前，尚未见组合法提取杜仲籽油的报道。一般利用有机溶剂，采用索氏回流法提取杜仲籽油，此方法得到的杜仲籽油常含有大量的植物蜡、糖类、蛋白质和色素等杂质。采用有机溶剂浸提-水蒸气法提取杜仲籽油，可以得到杂质含量少、颜色和气味纯正的杜仲籽油。本研究以杜仲籽粒为原材料，采用有机溶剂浸提-水蒸气法提取杜仲籽油，旨在探索出组合法提取杜仲籽油的最佳工艺条件，为其在食品、药品和化妆品领域的应用8-9]奠定基础。
1材料与方法
11材料与仪器
杜仲籽采自陕西省略阳县；石油醚（沸程30～60 ℃）购自成都科龙化工试剂厂；蒸馏水，实验室制。
FW-400A倾斜式万能粉碎机购自北京中兴伟业仪器有限公司；RE-52AA旋转蒸发器购自上海亚荣生化仪器厂；KH-50B型超声波清洗器购自昆山禾创超声仪器有限公司；索氏提取器、挥发油提取器。
12试验方法
121杜仲籽油提取工艺流程及其提取率的计算
杜仲籽FY（]40～50 ℃烘干FY）]杜仲干籽FY（]粉碎、过标准筛FY）]一定样品粒度的杜仲籽粉末FY（]浸入石油醚FY）]超声处理FY（]索氏回流提取FY）]杜仲籽粗脂肪FY（]水蒸气蒸馏FY）]杜仲籽油
杜仲籽油提取率=SX（]油质量（g）杜仲籽样品质量（g）SX）]×100%。
122单因素试验
1221样品粒度对杜仲籽油提取率的影响称取一定量的杜仲籽粉末样品，用滤纸筒包裹好，置于装有石油醚的烧杯中，于超声频率40 kHz、超声功率50 W的条件下，超声处理15 min，放入索氏提取器中，调节水浴锅温度至60 ℃，回流提取6 h，收集回流液旋转蒸发得到杜仲籽粗脂肪。根据粗脂肪的质量按料液比1 g ∶7 mL加入蒸馏水，蒸馏精制4 h，测量得到的杜仲籽油的质量，计算提取率。样品粒度分别为 20～40、>40～60、>60～80、>80～100、>100～120目，每个水平重复3次。
1222超声时间对杜仲籽油提取率的影响按“1221”节的方法，超声处理时间分别设置为5、10、15、20、25 min，其他条件不变，进行提取并计算提取率。每个水平重复3次。
1223料液比对杜仲籽油提取率的影响按“1221”节的方法，料液比分别设置为1 ∶3、1 ∶5、1 ∶7、1 ∶9、1 ∶11（g ∶mL），其他条件不变，进行提取并计算提取率。每个水平重复3次。
1224蒸馏时间对杜仲籽油提取率的影响按“1221”节的方法，蒸馏时间分别设置为1、2、3、4、5 h，其他条件不变，进行提取并计算提取率。每个水平重复3次。
123响应面法优化杜仲籽油的提取在单因素试验的基础上，根据Box-Behnken中心组合设计的实验原理，分别以X1、X2、X3、X4为代表样品粒度、超声时间、料液比、蒸馏时间4个因素，每一个自变量的低、中、高试验水平分别以-1、0、1进行编码，以杜仲籽油提取率为响应值（Y），进行4因素3水平共29个试验点的响应面分析试验，对杜仲籽油的提取工艺进行优化，因素水平编码见表1，每组平行试验3次。
13数据处理
响应面试验数据用Design ExPert 8061软件处理，其他数据用SPSS进行显著性分析，001
21单因素试验
211样品粒度对杜仲籽油提取率的影响
称取杜仲籽粉末10 g，按“1221”节的方法提取杜仲籽油，并计算提取率。样品粒度对杜仲籽油提取率的影响结果见图1。由图1可知，随着杜仲籽粉末的粒度逐渐减小，杜仲籽油的提取率逐渐上升，根据扩散定律10]：药材粉碎度越细，浸出效果越好，成分得率越高。当杜仲籽粉末粒度超过100目时，杜仲籽油的提取率呈现下降趋势，可能是样品粒度过小，超声处理时溢出的油被破坏分解，也可能是样品粒度越小，其他组分浸出的可能性增大，蒸馏精制时阻碍了杜仲籽油的蒸出。