柑橘炭疽病菌的生物学特性及枯草芽胞杆菌对其的抑制作用

摘要:近5年来,湖南麻阳苗族自治县的柑橘种植园发生柑橘炭疽病。采集发病柑橘植株,分离其病原菌,从病原菌的培养性状和形态学特征、内转录区(ITS)序列分析和系统发育关系比较等方面对该病原菌进行了鉴定,并探索了枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC 1.354对其的抑制作用。结果表明:该地区柑橘炭疽病菌为盘长孢状刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides)。枯草芽胞杆菌CGMCC 1.354对该病原菌具有较强的抑制作用,其分泌的抑菌物质能抑制柑橘炭疽病菌菌丝生长和孢子萌发。

关键词:柑橘炭疽病;盘长孢状刺盘孢;枯草芽胞杆菌;抗菌活性

中图分类号:S 436.661.14文献标识码:ADOI:10.3969/j.issn.05291542.2016.01.011Biological characteristics of citrus pathogen Colletotrichum gloeosporioides

and the inhibitory effect of Bacillus subtilis on the fungusZou Juan,Yao Zhuo,Shang Yonghua(Key Laboratory of Research and Utilization of Ethnomedicinal Plant Resources of Hunan Province,

Department of Life Sciences, Huaihua University, Huaihua418000, China)AbstractAnthracnose on citrus has occurred in Mayang Miao Autonomous County, Hunan Province in the recent five years. The pathogen causing citrus anthracnose was isolated from citrus orchards of Mayang Miao Autonomous County. Based on cultural and morphological characteristics, ribosomal DNA (rDNA) internal transcribed spacer (ITS) sequence analysis and phylogenetic relationships with other species of Colletotrichum, the pathogen was identified as Colletotrichum gloeosporioides. Bacillus subtilis CGMCC 1.354 showed strong antagonistic activity against the pathogen, and the antifungal substance produced by B.subtilis CGMCC 1.354 strongly inhibited the hyphal growth and spore germination of C.gloeosporioides.

Key wordscitrus anthracnose;Colletotrichum gloeosporioides;Bacillus subtilis;antagonistic activity 湖南省麻阳苗族自治县是该省柑橘的主产县,柑橘种植面积近1.3万hm2,年产量达30万t[1]。但是近5年来麻阳的柑橘炭疽病频繁发生并有加重的趋势。柑橘感染炭疽病后枝干、树叶和果实表面出现褐斑,易导致柑橘落叶、树干空洞和储藏期果实腐烂,直接影响果农的经济收益。据报道,广东省德庆县的名优柑橘品种和德庆贡柑大面积暴发过炭疽病,发病面积近 500 hm2,果园损失达2 000万元以上,给当地农业生产造成了很大的经济损失[2]。柑橘炭疽病又称褐斑病,病原菌为寄生真菌,该病菌在病树干或树皮上越冬,来年春季环境适宜时,尤其是阴雨潮湿时,病菌借风、雨、露水和昆虫等传播到嫩梢、新叶和幼果上。在有伤口(冻伤、灼伤、其他伤口)或树势生长衰弱时,该病菌即可萌发侵入,形成柑橘树干、树叶和果实的炭疽病,而潛伏在果实中的病原菌在贮藏期易引发柑橘褐斑腐烂。

目前柑橘炭疽病的防治以化学药剂为主[34],但农药在果实中的残留对人类健康存在潜在威胁,已成为全社会关注的问题。此外,杀菌剂的连续使用,可导致病原菌产生抗药性,使化学防治效果降低[5]。因此,在柑橘病害防治中,迫切需要寻找安全有效的防病新技术,以无毒高效的生物防治逐步取代化学杀菌剂。近年来,利用环境友好的生防菌防治植物真菌病害是国内外比较活跃的研究领域之一。生防枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC 1.354已广泛应用于微生物肥料和养殖水体净化[6],本研究首次发现该菌株对柑橘炭疽病菌具有良好的拮抗性能。本文探讨了柑橘炭疽病菌的生物学特性和枯草芽胞杆菌CGMCC 1.354对柑橘炭疽病菌的拮抗性能,为柑橘炭疽病菌的生物防治以及枯草芽胞杆菌CGMCC 1.354对柑橘炭疽病菌的生防价值和实际应用提供依据。

42卷第1期邹娟等: 柑橘炭疽病菌的生物学特性及枯草芽胞杆菌对其的抑制作用20161材料与方法

1.1材料

供试菌株为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC1.354,购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(北京)。

于湖南省怀化市麻阳苗族自治县的柑橘种植园中,从发病的‘冰糖橙’、‘脐橙’、‘椪柑’采集果实、枝茎、叶片。