怎样看待现在的病原微生物临床检验技术?

【中图分类号】R446.5      【文献标识码】A      【文章编号】1672-3783(2019)08-0025-02

感染是人类健康的主要“杀手” ,主要原因之一是当代的感染性疾病,在病原上发生了较大的变化,形成了现代感染性疾病在病原上的新特点,细菌的耐药性不断增强,同一种细菌对抗生素的耐药性可以完全不同,甚至出现同时耐多种抗生素的“多重耐药”细菌,往往使临床医师的“经验性”治疗或所谓的常规治疗根本无效。人类所感染的病原微生物日益复杂,病原微生物种类增多、范围变广,一些传统的病原微生物的感染力明显增强,同时还出现了许多新的病原体。病原微生物种类的增多、感染力的增强以及耐药性的增强给临床诊治带来了非常大的困难。

病原微生物如此复杂多变,为了提高各种疾病诊断、治疗效果,保障人们身体健康,就要求临床检验技术更加准确、快速,那么现阶段病原微生物的临床检验技术有哪些,他们各自又有什么优缺点呢?接下来我们逐一进行分析:

1 传统检验方法

细菌生化鉴定、细菌培养以及染色等都是病原微生物传统的检验方法,同时也是感染性疾病诊断的常用手段。

1.1 直接涂片镜检:该检验方法直接涂片染色进行镜检,具有快速、简便的优点,检验过程不需使用特殊的设备与仪器,通过镜检观察病原微生物大小、形态、排列情况,该检验方法对特殊形态的病原体适用,同时也是基层实验室中重要的检验方法之一。

1.2 分离培养及生化反应分离培养主要用于存在多种细菌时需要将其中一种细菌分离的情况,多用于痰液、粪便、血液、体液等,该检验方法需要一定的时间,且不可批量处理。所以为了提高检验效率,全自动化培养仪应运而生,不仅大幅度提高了可检验的菌种数量,还能同时进行细菌鉴定与药敏试验。

2 血清学、免疫学检验方法

血清学检验方法的出现,大幅度的简化了鉴定步骤,该检验方法是通过已知抗体、抗原来进行检测,从而鉴定病原微生物。血清学检验的常用方法有:血清凝集技术、荧光抗体检测技术、协同凝集试验以及酶联免疫测试技术等。其中,酶联免疫测试法不仅能够对病原体抗原进行检测,还能检测机体抗体成分,特异性、敏感性较高。

我们都知道,临床上非致病菌、致病菌常混合在一起,所以怎样精准的将目标菌分离出来非常关键。免疫磁珠分离技术,通过人工合成内部含铁成分的可吸引磁铁磁力,外部有功能基团,能够与活性蛋白质进行结合的磁珠,当磁珠抗体与对应的特异性抗原物质、病原体结合后,便会形成抗原-抗体的磁珠免疫复合物,能够在磁力作用下进行定向移动,从而达到将目标病原菌分离出来的目的,目前现有的针对各种病原体的免疫磁珠有:军团菌、大肠埃希菌以及白色念珠菌等【1】。该项技术具有简单、分离快速等优点,例如:应用该项技术检验白色念珠菌,可将检验时间缩短为4h,让临床检验效率明显提高。

2.1 基因检验方法:基因检验技术的出现是临床病原微生物检验技术的又一大进步,基因检验是通过对病原微生物的特有基因片段序列进行检测来鉴别,技术的进步让基因检测技术持续发展,其在临床中的应用也更加普遍。现阶段的主要基因检验技术有:核酸杂交技术、聚合酶链反应技术、基因芯片技术。

2.2 核酸杂交技术:该检验技术是通过核酸复性、变性的特点,在一定条件下让2条具有互补序列的核酸单链按碱基互补配对的原则形成异质双链。核酸杂交技术可分为固相杂交与液相杂交两类,常用的固相杂交有菌落杂交、Southern 印迹杂交、Northern 印迹杂交,该项检验技术具有快速、简便、特异性高、敏感性高的优点,对于那些难以分离培养和难培养的细菌来说有重要的检验意义。

3 聚合酶链反应技术:

聚合酶鏈反应是模拟DNA复制的过程,是一种简便、快速的特异性DNA体外扩增技术,该项技术能将所研究的基因或基因片段扩增数百万倍,且只需要几个小时即可。将聚合酶链反应的产物通过核酸探针杂交法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法等方法进行检验【2】。因可对研究基因进行扩增,所以该项技术尤其适用病原微生物感染早期的诊断。该项技术从基因扩增逐渐发展到基因克隆以及基因改造,检验诊断性也在逐步提升。

在聚合酶连反应技术的基础上,多重聚合酶链反应检验技术被提出,该项技术可以实现对多个核酸片段扩增,检验效率明显提高。因该项技术能够同时检验同一反应管中的多种病原微生物,不仅节约了时间及试剂,同时也大幅度降低了检验费用。

4 基因芯片技术:

该项技术是在核酸分子杂交技术上发展而成,通过微加工技术,将成千上万的DNA片段有规律的排成二维DNA探针阵列,并将其固定到固态支持物上,让其与样本分子作核酸杂交【3】,从而让传统杂交技术更简洁、快速。将基因芯片技术应用到病原微生物的诊断中,可明显缩短诊断时间,同时还能检验出病原体是否存在耐药性,以及对哪些药物耐药,对哪些药物敏感等,从而为临床用药提供参考。但是该项技术的制作成本较高,芯片检测的敏感性也需提高,所以该项技术还局限于实验室研究,未能在临床中得到广泛应用。

5 结语

综上所述,随着生存环境的改变及其他因素的影响,病原微生物日益复杂,各种新病原微生物的出现以及耐药性的增多,给临床检验技术提出了更高要求。为了提高临床治疗效果,快速、准确的病原微生物检验技术非常关键,随着生物学研究的进展,病原微生物的检测方法从最初的组织形态发展到分子、基因水平,检验准确性、检验效率均明显提高,检验技术的持续发展为临床检验提供可更多选择。但各项检验技术都有自身的优、缺点,临床检验时,应根据患者群体、实验室环境、患者经济能力、病情等综合考量,选择适宜的检验方法,以达到最佳的检测效果,为临床诊断、用药提供参考,更好的为人类健康提供服务。

参考文献

[1] 任晓东,刘昌亚.分子技术在临床微生物检验中的应用探讨[J].中西医结合心血管病电子杂志,2019,7(04):189.

[2] 张新安.微生物检验在临床应用中的质量控制要点探讨[J].临床检验杂志(电子版),2019,8(01):197-198.

[3] 李金丽.快速检验技术在微生物检验中的效果观察及影响因素研究[J].首都食品与医药,2017,24(16):146-147.