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[摘要] 目的 依托齐齐哈尔医学院三所附属医院和齐齐哈尔市第一医院的临床资源，建立一个系统的、规范的乳腺癌组织标本库，为临床和科学研究者提供合适数量的肿瘤标本，从而促进乳腺癌发病机理的研究。 方法 收集乳腺癌患者手术切除后的新鲜肿瘤组织，包括肿瘤组织1.5 cm距离的癌旁组织、肿瘤组织和距离肿瘤组织>5 cm的切缘远端非肿瘤组织以及肿瘤患者的全血和血清/血浆标本。采用一套信息管理体系对于标本进行管理，所有的标本及其相关临床信息资料均录入数据库，可随时调用和查询。 结果 从2012年6月创建至2015年3月，共收集261例乳腺癌患者新鲜组织；全血和血清共1 989份，全套标本者 176 例。 结论 建立了一套系统的，具有一定规模的乳腺癌组织标本资源库，形成了规范的管理办法和建设规划，为今后乳腺癌的基础与临床研究提供物质与信息资源。
[关键词] 乳腺癌；组织标本库；数据库
[中图分类号] R737.9 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2016）10（c）-0008-04
Construction and Management of Breast Cancer Tissue Specimen Bank
WEN Xian-chun1， LI Zu-bin1， CHEN De-qing2， GE Bin2， BAO Hong-guang1， CAO Wei-hai2， LIU De-shui1， YUE Li-ling1， LIU Ji-cheng1
1.Qiqihar Medical College， Qiqihar，Heilongjiang Province， 161006 China；2.Qiqihar First Hospital， Qiqihar，Heilongjiang Province， 161005 China
[Abstract] Objective To establish a systematical and standardized breast cancer tissue specimen bank based on the clinical resources of Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical School and Qiqihar First Hospital and provide a suitable number of tumor specimens for clinical and scientific researchers thus promoting the research of breast cancer pathogenesis. Methods The fresh tumor tissues of the patients with breast cancer after resection were collected， including the peritumoral liver tissues at 1.5cm from the tumor tissues， tumor tissues and incisal margin distal non-tumor tissues at >5 cm from the tumor tissues and whole blood， serum/plasma specimens of the tumor patients， and the specimens were managed by a set of information management system， and all specimens and related clinical information data were input into the database， and could be invoked and inquired. Results From June 2012 to March 2015， 261 cases of fresh tissues of patients with breast cancer and 1989 pieces of whole blood and serum and 176 cases of full set of specimens were collected. Conclusion The establishment of a set of systematical breast cancer tissue specimen resource bank with a certain scale and formation of standardized management method and construction plan can provide material and information resources for the basic and clinical research of breast cancer in future.
[Key words] Breast cancer； Tissue specimen bank； Database
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，且其发病率和病死率仍在逐年增加，在女性肿瘤中居首位[1-2]。因此，有关乳腺癌细胞和动物模型成为了乳腺癌研究的热点领域，如果乳腺癌肿瘤标本建设不够完善，会导致临床资源的巨大浪费，为了提高肿瘤标本资源管理效率，及时为科研提供优质的，足够数量的标本，齐齐哈尔医学院依托三所附属医院和齐齐哈尔市第一医院的临床资源优势，于2012年6月组建乳腺癌组织标本库，收集乳腺癌患者的肿瘤组织标本、全血、血清和血浆，探索了一条规范化的样本采集、转运、储存和管理办法[3-5]，为今后开展肿瘤科学研究工作提供服务平台。
1 乳腺癌组织标本库的建立
1.1 标本来源及伦理问题
由齐齐哈尔医学院三所附属医院和齐齐哈尔齐市第一医院收治，经各院病理科确诊为乳腺癌的患者。在收集患者标本之前，对标本采集以及意义进行说明，必须得到患者以及患者家属的知情同意书，经齐齐哈尔医学院伦理委员会批准，并与相对应的病理科和临床科室进行统一管理和协商，保证在病理诊断的基础上收集标本[6]。
1.2 主要仪器设备
-80℃超低温冰箱（美国Thermo），-150℃超低温冰箱（海尔），并连接温度监控报警系统；-20℃冰箱（美菱）；液氮罐（四川金凤低温设备公司）；医用离心机（北京时代北利离心机有限公司）；生物安全柜、取材器械、信息管理软件、二维条码打印机及相关匹配的联想电脑等。
1.3 标本收集和处理
1.3.1 组织标本收集、处理及保存 在手术室内临床医生选择相应的病例。在不影响病理诊断取材的情况下，肿瘤组织离体后30 min 内，按肿瘤、瘤旁和切缘远端非肿瘤组织区分，分别切取4～6块组织（约为0.5 cm×0.5 cm×3 cm），在已经标记好二维码的冻存管放入组织并置于液氮中处理30 min ，然后再置放于-80℃超低温冰箱储存同时，切取一小块组织采用石蜡包埋，蜡块编号，分类存放。
1.3.2 血液标本的收集、处理和保存 根据临床医生选择的病例，在此病例中收集患者血液标本。采血分为抗凝血和非抗凝血各5 mL，2 h内将非抗凝血分离血清，200 μL/管分装，连同抗凝血（即全血）经二维条码打印机标记，放置于在-80℃超低温冰箱储存[7]。
1.4 标本的质量控制
1.4.1 肿瘤采取的准确性 所有标本均经病理专业技术人员判定，确保肿瘤癌旁组织和肿瘤组织以及切缘远端非肿瘤组织的正确采集，明确区分肿瘤组织与非肿瘤组织，采集者部分组织时，均要注意肿瘤组织的大小、形态、数量、硬度、颜色等因素， 确保采集各种组织的质量。
1.4.2 血液标本的质量 本研究评价血液标本质量均采用血液管理质量标准，主要包括：①标本是否出现溶血或者脂血甚至出现黄疸。②确保血液标本达到血液量的标准，保证足量；③标本不能出现凝血。
1.4.3 控制标本的离体时间 有专人定时到手术室内收集新鲜的肿瘤组织标本，保证时间控制在标本离体时间在30 min内，在采取标本和转运过程中避免肿瘤组织、癌旁组织以及切缘远端非肿瘤组织相互污染，注意避免基因组DNA、RNA和蛋白的降解。
1.4.4 标本的控制与抽查 每日巡查温度监控系统的记录值，定期检测低温冰箱的报警系统，确保组织标本和血液标本的存放环境，定期采用随机方式抽取样本，提取基因组DNA、RNA和蛋白，采用紫外分光光度计测量样本的浓度和纯度。
2 标本库的日常规范化管理
2.1 数据库管理
在信息化支持方面，引进了信息化管理软件，这为信息化建设提供了信息平台，数据库主要包括：①患者的个人资料，包括患者性别、年龄、家庭收入、职业等基本资料，临床资料和病理诊断，行为生活方式等病例资料。②临床诊断信息：血常规、胸部CT、血生化等临床检查指标。③标本信息：标本编号、日期、肿瘤部位、病变部位和病理类型等信息。④使用管理登记：包括出库编号、日期、使用人及使用单位和审批人（经学院主管领导和标本库负责人审批后才可使用），登记使用数量。
2.2 标本库的管理
通过排班制度，专人负责标本的收集、存储和出库工作，定期巡查设备的运行状态[8]。标本库专业技术人员保持与各医院手术科室、手术室、病案室密切联系，学院主管领导定期与各所医院及时沟通，保证标本收集工作顺利进行。
3 结果
自2012年6月乳腺癌组织标本库建库以来，积极与各所医院相关科室进行密切联系和沟通，尽可能第一时间收集新鲜的乳腺癌组织标本。截至2014年3月份新鲜乳腺癌组织标本261例，其中导管内癌 32 例，小叶原位癌 10例，浸润性导管癌 166例，浸润性小叶癌 53 例全血和血清共1989份，其中全套标本（即同例患者同时具有全血、血清和组织标本）有187例，见表1和表2。
同时该院引进标本库信息数据管理软件，将标本库管理进入信息化管理模式，到目前为止，标本库已经提供组织标本75份，这些标本所提取DNA、RNA及蛋白质量，效果良好。
4 讨论
根据临床数据统计发现乳腺癌已经成为女性发病率最高的恶性肿瘤，且患病人数呈现逐年增加的趋势。目前，随着手术技术的成熟和放疗化疗技术的发展，均提高了早期乳腺癌患者的生存率，但是晚期或者是复发患者的治疗仍然是临床工作的难题，仍居女性因癌症死亡原因之首[9]。近年来，乳腺癌的基因治疗和靶向药物成为了研究主要发展对象，在这样的基础上，更需要乳腺癌标本库的建立为临床研究工作提供足够数量和质量的标本[10]。
乳腺癌组织标本库创建为开展乳腺癌疾病发病机理及临床治疗研究具有重要意义。虽然肿瘤的研究技术蓬勃发展，乳腺癌已经成为肿瘤研究中的重点领域，但是动物实验和细胞株的研究均具有一定的局限性，而人的自身组织是研究肿瘤工作的有效途径。因此建立一定规模和规范化管理的标本库成为了这些研究的基础。国外已经建立起了肿瘤组织库和规范化的管理模式[11]，而我国也紧跟国际步伐建立起了肿瘤标本库，国内一些大学、医院及科研单位已经建立或开始筹备肿瘤组织标本库，如北京大学、华西医科大学及广州医学院第一附属医院等[7，12-13]。目前东北地区尚没有一所院校或科研单位建立成规模的组织标本库。因此，齐齐哈尔医学院于2012年6月以学校牵头，各所附属医院和齐齐哈尔第一医院医院临床科室、病理科和手术室协助，筹建了符合临床科室和科学研究的乳腺癌标本库从而整合了各所医院宝贵的临床标本资源。标本库的建立一方面主要从以下几个部分严把质量关：从标本的采集、转运、储存、抽检、管理和出入库的规范化管理模式，以满足科学研究的需要。另一方面严格按照标本库的规章制度进行管理，必须专人管理，负责取材、处理、入库、编号及出库等信息处理，以保证样本的均一性。
高质量的人体标本是乳腺癌分子生物学及临床研究的先决条件。标本库必须具有规范统一的取材标准及定期的质量控制，才能保证标本的有效性及稳定性。因此建立规范化、 标准化乳腺癌组织标本库不仅可以充分保护、 合理利用临床资源， 而且可为基础和临床研究提供高质量的服务平台。
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